观察青光安Ⅱ号方及其不同浓度有效组分对青光眼模型小鼠视网膜神经节细胞的保护作用及其作用机制。
实验动物:选取8只正常对照的C57BL/6小鼠,以及48只38周龄的DBA/2J小鼠,后者用于建立慢性高眼压青光眼模型。所有动物均获得适宜的饲养条件和充足的食水。
分组与处理:DBA/2J小鼠随机分为6组:模型组、益脉康分散片组、青光安Ⅱ号方汤剂组以及青光安Ⅱ号方有效组分的低、中、高浓度组。正常对照组C57BL/6小鼠灌胃蒸馏水。模型组小鼠也接受蒸馏水处理,而其他治疗组小鼠分别接受相应的药物或有效组分的灌胃。
眼压测量:所有动物在实验开始前进行了为期3天的适应性饲养。眼压的测量是在小鼠清醒状态下进行,由两名实验人员配合完成。使用Tono-pen AVIA接触式眼压计,每隔4周在上午9:00至12:00期间进行一次测量。每只小鼠的眼压值取连续10次测量的平均值作为该次测量的结果,同时确保LCD上显示的置信指标达到或超过95%,以保证测量数据的准确性与可靠性,为研究提供了可靠的基础数据。
视网膜组织学检查:使用HE染色观察视网膜组织的形态结构变化,通过TUNEL染色评估视网膜神经节细胞的凋亡情况。
统计分析:采用SPSS软件进行数据分析,计量数据以均数±标准差表示,通过单因素方差分析(ANOVA)及后续多重比较测试来比较不同组之间的差异。P值小于0.05被认为具有统计学意义。
高浓度的青光安Ⅱ号方有效组分可以明显改善青光眼模型小鼠的视网膜结构,抑制视网膜神经节细胞凋亡,激活Wnt/β-Catenin/Pax6信号通路,为青光眼的治疗提供了新的研究方向和潜在的治疗手段。
美国锐科Reichert® Tono-Pen Avia® Vet压平式动物眼压计